傅里葉變換紅外光譜(FTIR)分析技術(shù)正不斷發(fā)展和進(jìn)步,不僅成功應(yīng)用于蛋白質(zhì)、糖原、核酸等生物大分子的結(jié)構(gòu)分析,而且還被用于研究細(xì)胞和組織等更加復(fù)雜的體系,尤其是腫瘤細(xì)胞和組織分析。目前FTIR已廣泛應(yīng)用于生物學(xué)多個(gè)領(lǐng)域中,如細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、動(dòng)物學(xué)、植物學(xué)、生態(tài)學(xué)、免疫學(xué)等等。
FTIR技術(shù)在生物樣品研究中具有以下幾個(gè)優(yōu)點(diǎn):
1)快速無損,無需試劑,樣品用量少,各形態(tài)樣品均適合,不破壞樣品結(jié)構(gòu),既可研究樣品表面結(jié)構(gòu),又可研究樣品整體結(jié)構(gòu);
2)能在分子水平上直接了解研究分子或體系的機(jī)構(gòu),得到基因生物功能信息,新化學(xué)鍵的形成及類型,以及環(huán)境對(duì)生物樣品的影響;
3)結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)方法,可有效提取復(fù)雜信號(hào)中的有用信息,準(zhǔn)確進(jìn)行成分的定性鑒別和定量分析,而且可以同時(shí)測(cè)定多個(gè)指標(biāo)。
下面力晶小天為大家簡(jiǎn)單介紹一些成熟的應(yīng)用實(shí)例:
1、生物大分子中的應(yīng)用
細(xì)胞是器官和組織的最小組成單元,而細(xì)胞是由核酸、蛋白質(zhì)、脂類和糖類等生物大分子組成的。細(xì)胞的紅外光譜由這些分子的振動(dòng)光譜疊加組成,它反映這些組分在細(xì)胞內(nèi)的量及構(gòu)型構(gòu)象等信息,人體組織和細(xì)胞的紅外光譜特征吸收頻率和振動(dòng)方式。
我們知道,葡萄糖、低密脂蛋白膽固醇、甘油三酯和尿素是血清中的四種主要代謝成分,也是人體健康和亞健康的重要臨床指標(biāo),逐漸得到人們的重視,已有學(xué)者建立了用FTIR對(duì)四項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行同時(shí)快速定量檢測(cè)的方法。暨南大學(xué)的尹浩優(yōu)化了全血樣品中血紅蛋白濃度、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量和平均紅細(xì)胞體積三項(xiàng)指標(biāo)的紅外快速檢測(cè)方法,可大范圍篩查地中海貧血癥。還有研究表明,利用FTIR對(duì)人體血清樣本的各種臨床生化指標(biāo)進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè),能夠快速地提取細(xì)胞變異信息,進(jìn)而及時(shí)控制病變。
2、腫瘤方面的應(yīng)用
近二十年來,很多學(xué)者把FTIR運(yùn)用到早期癌癥診斷上,癌細(xì)胞的基本生物化學(xué)特征是腫瘤的FTIR分析的基礎(chǔ)。與正常組織的紅外光譜相比,腫瘤組織的紅外光譜在峰形、峰強(qiáng)、吸收頻率等方面都有非常顯著的差異。這些差異提示:癌變細(xì)胞和組織中核酸相對(duì)含量增加,糖原或膠原的相對(duì)含量下降,核酸分子中磷酸二酯基團(tuán)的氫鍵結(jié)合力增強(qiáng),脂質(zhì)中亞甲基鏈變得更無序。已有很多人通過對(duì)核酸內(nèi)部的磷酸二酯,癌變組織中糖原,蛋白質(zhì)分子中的絲氨酸、蘇氨酸和酷氨酸等吸收峰的檢測(cè),鑒別胃、食道、乳腺、皮膚、結(jié)腸癌等細(xì)胞,并對(duì)病程進(jìn)展各期:正常→微小病理變化→惡性期做出診斷。
相對(duì)于腫瘤組織和細(xì)胞,尿液和血清樣本更易獲得,電子科技大學(xué)的楊紅霞分別檢測(cè)了兩百多個(gè)癌癥患者的尿液和血清樣本的紅外光譜,驗(yàn)證了癌癥樣本光譜的峰形和峰強(qiáng)與正常人的明顯差異。尤其是用FTIR檢測(cè)血清樣品,診斷的準(zhǔn)確率很高,從而建立了癌癥早期篩查的有效方法。
更多人運(yùn)用蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)檢測(cè)方法,對(duì)癌癥進(jìn)行診斷篩查。紅外光譜法應(yīng)用于蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的定性和定量分析已有幾十年的歷史,是一種非常成熟的分析方法,人們對(duì)各類蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)紅外吸收峰,以及同類蛋白質(zhì)不同組分的特種頻率和指認(rèn),都已非常明確。目前,蛋白質(zhì)紅外檢測(cè)方法已廣泛應(yīng)用于藥物研發(fā)、產(chǎn)品質(zhì)量控制和出廠檢測(cè)中,力晶小天將會(huì)在下期為大家介紹蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)分析的相關(guān)內(nèi)容。
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